用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標本或標準品、HRP標記的親和素,經(jīng)過洗滌后大鼠elisa試劑盒用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
大鼠elisa試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本大鼠elisa試劑盒采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
4.樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋10,000倍。
注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
ELISA試劑盒操作注意事項:
1、試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應充分大鼠elisa試劑盒拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7、底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作
好了以上是大鼠elisa試劑盒采集及保存方法.上海通蔚生物科技有限公司將進一步加強人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新,持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟爭力,實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化大集團企業(yè),更好、更快捷、更*的服務于生命科學領域,迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。
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